尊龙凯时推出的古典猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒(实时荧光PCR法)是用于检测古典猪瘟病毒的重要工具。此试剂盒的通用名称为古典猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒(实时荧光PCR法),英文名称为Classical Swine Fever Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)。每盒的包装规格为50T,能够满足大多数实验需求。
预期用途
本试剂盒专为古典猪瘟病毒的检测设计,适用于临床辅助诊断,但并不用于确诊。
原理
此试剂盒基于古典猪瘟病毒高度保守区域设计了特异性的引物和探针。当反应体系中存在古典猪瘟病毒基因组模板时,PCR反应会释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪,可以实时监测和输出PCR信号,从而完成定性分析。
试剂盒组成
此试剂盒包含:
- PRRSV RT-PCR反应液:875μL × 1管
- PRRSV混合酶液:125μL × 1管
- PRRSV阳性对照:40μL × 1管
- PRRSV阴性对照:40μL × 1管
- 说明书:1份
储存条件及有效期
本试剂盒应避光保存于-20℃以下,避免反复冻融,有效期为12个月。
适用仪器
本试剂盒适用于ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列及杭州博日系列等多通道实时荧光定量PCR仪。
样本要求
样本可包括血液、血清、肺脏、淋巴结及脾脏等,具体要求如下:
- 血液或血清样品应使用无菌注射液采集。
- 取样后应立即检测;如无法立即检测,可在2~8℃冷藏过夜,长期保存应在-80℃以下冷冻。
- 明确避免样品间的交叉污染。
检验方法
试剂的准备和样本的处理需要严格遵循操作流程。首先从试剂盒中取出所需试剂,确保充分融化并瞬时离心。然后计算所需反应数,并准备RT-PCR反应液和混合酶。接着提取RNA并分装至PCR反应管中,加入样本RNA和对照品后,转移至PCR仪进行检测。
参考值
尊龙凯时建议参考以下值判定试剂盒有效性:
- 阳性对照需显示典型S型扩增曲线或Ct值≤35。
- 阴性对照的Ct值应>38或无Ct值,显示线性状态。
- 标本结果:阳性为Ct值≤35,可疑为35~38,阴性为Ct值>38。
注意事项
1. 实验室应遵循国家基因扩增检验实验室管理规范。
2. 样本处理应在0-4℃条件下进行,并立即检测。
3. 所有器具须经过无污染处理,避免交叉使用。
4. 检测结束后应对工作台进行清洁。
5. 吸取反应液时应避免气泡生成。
总之,选择尊龙凯时的古典猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒,能够为古典猪瘟病毒的检测提供可靠的支持。